摘要
目的:建立微生物转谷氨酰胺酶(mTG)介导的蛋白质在赖氨酸(Lys)残基水平上聚乙二醇化的方法。
结果:将羧苄酰谷氨酰甘氨酸(CBZ-QG)引入mPEG胺,制得羧苄酰谷氨酰甘氨酸甲氧基聚乙二醇(CBZ-QG-mPEG)。傅里叶变换红外光谱和SDS-PAGE分析表明,CBZ-QG-mPEG成功合成,并能被mTG识别为修饰治疗蛋白细胞色素c (cyt c)的酰基供体。最后,在优化条件下(cyt c 0.5 mg/ml, CBZ-QG-mPEG 11.25 mg/ml, mTG 0.5 mg/ml, 37℃,2 h), PEGylation率达到76.5%。
结论:本文首次研究了mTG在赖氨酸残基水平上催化蛋白的聚乙二醇化,该方法可用于固定化活性蛋白和修饰治疗蛋白。
关键词:赖氨酸残基;微生物转谷氨酰胺酶;PEGylation;治疗性蛋白质;转谷氨酰胺酶。
Biotechnol Lett. 2016 Jul;38(7):1121-9. doi: 10.1007/s10529-016-2083-6. Epub 2016 Mar 29.
PEGylation of cytochrome c at the level of lysine residues mediated by a microbial transglutaminase
Jian Qin Zhou 1, Ting He 1, Jian Wen Wang 2
以上研究使用赛诺邦格的产品:
产品名称:mPEG-NH2
产品简称:甲氧基聚乙二醇胺
产品名称:mPEG-SPA
产品简称:甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丙酸酯
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